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载体构建

质粒是使用广泛的基因操作工具,可以进行编码基因、microRNA、lncRNA的功能研究、启动子活性、转录因子及3’UTR调控研究等。

工具载体通常包括原核表达载体、普通真核表达载体、慢病毒载体、腺相关病毒载体、腺病毒载体和逆转录病毒载体等。针对病毒载体,包装生产的病毒颗粒可以直接用于感染细胞或者动物实验。



质粒载体优势
1.  瞬时表达,导入细胞后约24 小时就可以观察到目的基因的表达;
2.  构建技术简单,成本较低。


普通真核质粒 慢病毒 腺病毒 腺相关病毒
基因组 daDNA dsRNA dsDNA ssDNA
外源基因装载量 大于10kb 小于4kb 小于5kb 小于2.5kb
基因组整合 随机低频整合 随机高频整合 非整合 低频定向整合
表达起始时间(细胞) 1-2天 3-4天 1-2天 1-2天
表达起始时间(动物) -- 1周 2-4天 2-4周
表达持续时间 1周左右 整合后持续表达 2周左右 3-6个月
免疫原性 低免疫原性 低免疫原性
高免疫原性
低免疫原性

合生生物提供各类载体构建服务:

1、干扰/过表达载体
2、甲基化载体
3、BIFC载体
4、cas9/casX/cas13d载体
5、报告基因载体构建
6、基因突变
7、载体改造
8、miRNA、lncRNA表达载体构建


载体选择

载体选择
合生提供完善的慢质粒产品体系,用于操作编码基因和非编码基因,如lncRNA、microRNA、circRNA。以下载体可供您选择

载体编号 骨架 备注 功能
pHS-B-0080 pLV-hef1a-mNeongreen-P2A-Puro-WPRE-CMV-MCS-3flag mNeongreen(超级绿色荧光)+Puromycin筛选+flag 过表达慢病毒载体
pHS-B-0169 pLV-hef1a-mScarlet-P2A-Puro-WPRE-CMV-MCS-3Xflag mScarlet(超级绿色荧光)+Puromycin筛选+flag 过表达慢病毒载体
pHS-B-0094 pLV-CMV-MCS-EGFP-3Xflag-IRES-Puro EGFP(绿色荧光)+Puromycin筛选+flag 过表达慢病毒载体
pHS-B-0096 pLV-hef1a-Bla-WPRE-CMV-MCS-3Xflag Blasticidin筛选+flag 过表达慢病毒载体
pHS-BVC-LW398 pLV-EF1a-hluc-P2A-Puro-WPRE-CMV-MCS-3Xflag Luc+Puromycin筛选+flag 过表达慢病毒载体
pCDNA3.1(+) pCDNA3.1(+)-CMV-MCS G418筛选 过表达真核载体
pHS-B-0173 pIRES-CMV-MCS-3flag-IRES-EGFP EGFP(绿色荧光)+G418筛选 过表达真核载体
pHS-BVC-LW439 pLV-hef1a-mNeongreen-P2A-Puro-WPRE-CMV-5' Circular Frame-MCS-3' Circular frame mNeongreen(超级绿色荧光)+Puromycin筛选 过表达环状RNA载体
pHS-BSR-LW034 pLV-hU6-shRNA-CMV-EGFP-T2A-puro EGFP(绿色荧光)+Puromycin筛选 干扰慢病毒载体
pHS-BSR-LW025 pLV-hU6-shRNA-hef1a-mNeongreen-P2A-Puro mNeongreen(超级绿色荧光)+Puromycin筛选 干扰慢病毒载体
AVC-YW102 pLV-hEF1a-EGFP-2A-Puro-sponge EGFP(绿色荧光)+Puromycin筛选 miRNA干扰(sponge)
pHS-BCR-LW101 pLV-hU6-sgRNA-gRNA_backbone-CMV-NLS-dCas9-VP64-T2A-Puro Puromycin筛选 转录激活载体
lentiCRISPR V2 lentiCRISPR V2_U6-sgRNA -EFS-hCas9-2A-Puro Puromycin筛选 cas9载体


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